英文名称:Carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester
CAS:150347-59-4
分子式:C29H19NO11
分子量:557.47
CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFDA SE标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。 由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDA SE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞,从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后,分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。 使用CFDA SE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。 CFDA SE标记细胞呈绿色荧光,检测时的激发波长可以选择488nm,此时的发射波长为518nm,使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDA SE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDA SE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDA SE标记细胞仅需5~15分钟即可完成。对于不同细胞,最佳标记时间需自行摸索。 |
组分 | 规格 |
CFDA SE | 5mg |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,避光,有效期6个月。
- 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
CFDA SE可以使用无水DMSO配制,配制浓度通常为2~10mM。配制好的溶液宜当天使用完毕,不宜长时间保存。CFDA SE标记细胞时的最终浓度通常为0.2~10μM或更高一些。在工作浓度为5μM时,一个包装的本产品共可以标记约1.8升的细胞。
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